对精子储存和冷冻保存的兴趣最早可以追溯到1776年,当时意大利牧师和生理学家Spallanzani首次发现了精子在被雪中冷却不会动的现象。
19世纪,Montegazza成功地将精子冷冻在-15°C,并首次提出了“人类精子库”的概念。
1949年,Polge等人发现甘油可以保护精子免受低温的影响,为冷冻技术带来了突破。
而人类精子的探索则是在1953年Sherman和Bunge等人开始,发展至今已有70多年的历史。
精子冷冻保存技术简单来说就是将精液经过特殊处理后,保存在超低温的环境中以达到长期保存精子活力。目前冷冻保存技术已经相当成熟,并广泛运用到辅助生殖领域。
精液冷冻技术的原理
作为目前且唯一有效的男性生育力保存方法,冷冻保存技术可不是随随便便就把精子放进冰箱这么简单,“蝌蚪们”对冷冻有着极高的条件与要求。下面就来简单看看“蝌蚪们冰封”的原理吧!
一个质量合格的精子诞生需要过五关斩六将,最终形成头、颈中、尾三个主要的部分,精子头部包含着我们生育下一代必不可少的遗传物质(DNA),颈中段拥有能使得精子运动的供能装置(线粒体),尾部则是类似可以旋转的扇叶,是精子运动必不可少的装备。因此冷冻过程就是要减少对其三者的损伤。
细胞在冷冻过程中,冷冻损伤的发生是不可避免的,虽然影响机制存有争议,但目前多数学者认为,引起细胞冷冻损伤的主要因素为渗透压的改变和细胞内冰晶的形成。
简单来说,精液直接冷冻过程中会吸水涨破或者形成锋利的冰晶刺伤精子细胞结构,俩者都会使精子活力丧失。
因此,我们还需要添加冷冻保护剂和选择合适的降温速度以减少冷冻损伤。
最常见的冷冻保护剂为甘油可以提高精子细胞膜对水的通透性,使精子内部水分流出,减少冰晶的形成,此外还有一些糖类、蛋白类等物质也被加入提高精子的冷冻指数与存活率。
精液冷冻复苏流程
1、精液取出后,在37℃水浴摇床内液化;
2、待精液充分液化后取样,按照《WHO人类精液检查及处理实验室手册》进行精液分析,包括精液体积、精子浓度、精子活力等;
3、将密制冷冻保护剂复温至室温并平衡,根据精子浓度和活力情况按比例添加并混匀;
4、将混匀的精液分装至冷冻管或麦管内并做好贴标签,输单等记录;
5、将冷冻管或麦管置于程序冷冻仪降温;
6、将冷冻管或麦管放入保存盒,直接投入液氮(-196℃)保存;
7、待到主人有需要的时候从液氮中取出小蝌蚪们置于37℃复苏;
8、根据精子浓度和活力等情况选择不同的处理方式运用于临床。
除了以上针对健康男性的常规冷冻外,少弱精、梗阻性无精等患者还可以选择微量,单精子,睾丸组织冷冻等技术,总有办法将你的小蝌蚪们保存好。
哪些男性需要进行精液保存?
首先接受辅助生殖治疗的男性当中,如果有取精困难的,无精症的患者,但是他能够通过一个精皮,睾丸附睾的精子抽吸术,或者是睾丸纤维取精素取得精子,那么可以在这个之前进行一个手术,精子冷冻保存,进行一个试管助孕治疗,避免反复的一个侵入性操作。另外一些少弱精患者,特别是那些精液数量、质量呈进行性下降趋势的这部分病人,为了避免将来出现无精症的一个风险,其他,比如说从事一些可能影响生育的职业,接触有毒有害的放射性物质的男性,另外需要保存生育力的一个恶性肿瘤,我们在放化疗治疗前也可以进行一个精液的冷冻保存。