在辅助生殖技术中,精液标本的处理是体外精子优选的关键步骤,其目的在于确保获取足够数量的高质量活动精子,这对于试管婴儿治疗和人工授精治疗至关重要。精液优化处理不仅去除精浆、杂质、细胞碎片等有害物质,还能使精子获能,从而提高受精的可能性。
做试管是如何优选精子的?
精液标本的处理过程实际上是体外精子的首选过程。在辅助生殖辅助妊娠治疗过程中,获得足够数量的“优秀”活性精子是非常重要的。精液优化处理不仅能去除精浆、杂质、细胞碎片等有害物质,还能使精子获得能量,最终优化体外受精治疗和人工授精治疗的活性精子。
优化精液的方法有很多种,这里介绍三种常用的处理方法。
1、直接上游法
适用于精液质量较好的患者,该方法利用活力较好的精子优先向上游到培养液表面的运动能力原理。
处理过程:将液化精液放在离心管底部,缓慢添加适量的培养液,然后将离心管倾斜到培养箱中。一段时间后,活性强的精子会聚集在液体表面上方,精浆、精浆中的杂质和死精子、老精子、弱精子和残精子会留在底部。通过吸收上层培养液,可以收集到活力较好的精子,比例较高。然后用1.5吸收上层培养液(含高活力精子)~2.0 ml培养液稀释,3000~500g离心5分钟,弃上清液,根据需要重复上步,再洗一次。最后加入0.5ml培养液重悬精子沉淀团备用。
2、直接离心法
适用于精子浓度低、活力差的精液标本,或通过附睾和睾丸穿刺获得的精子。培养液和精液完全混合后,直接离心,尽可能多地回收精子。
3、密度梯度离心法
可用于各种精液质量条件下的精液处理,即将梯度液从上到下分配成不同浓度的梯度层,将液化精液放置在低密度梯度上方。利用不同成熟阶段精子与各种细胞成分之间的密度差,即不同的沉降系数,在一定的离心力作用下,每个细胞在离心结束后都位于不同的界面上。由于成熟正常的精子沉降系数略高,首次离心后,筛选出的优良精子会以白色软沉淀团的形式存储在离心管底部,其他杂质和异常精子会停留在上层。然后用吸管小心去除上浆和梯度液,将下白色沉淀放入另一个含培养液的离心管中,混合均匀,继续离心。根据需要,可以重复上步,再次清洗。最后,通过调整精子浓度,可以获得所需的优良精子。此外,密度梯度离心法可以根据不同的精液质量进行调整,特别是调整离心时间、离心速度和梯度体积,以优化患者的精液。
生殖中心的每个精子优化操作人员都必须经过国家人类辅助生殖技术培训中心的严格培训,掌握每种精液优化处理方法。在精液优化处理的整个过程中,严格执行无菌操作和“双人”检查系统,避免交叉污染和错误。根据不同的精液样本,准确判断和选择合适的优化方法,筛选出具有良好活力的精子来帮助怀孕。